溴脱氧尿苷(brdu)治疗

波士顿大学环境健康与安全办公室

OEHS政策和指导方针

2008年12月3日修订

我使用

溴脱氧尿嘧啶(BrdU)是一种人工合成的胸腺嘧啶类似物,当细胞分裂时(在细胞的s期),它被整合到细胞的DNA中。BrdU通常用于活组织中增殖细胞的检测或作为细胞周期标记物。它要么在安乐死前不久给动物注射,要么作为一种慢性治疗。长期给药的一个常见原因是为了监测实验给药的干细胞的增殖。

在可能的情况下,应该使用一种更安全、毒性更小的BrdU替代品。

2。毒性

BrdU是一种诱变剂、致畸剂和细胞毒素。

3。个人防护装备(PPE)

当在LASC之外与BrDU一起工作时,PPE应至少包括一件实验服,丁腈手套,符合ANSI Z-87标准的防护眼镜,提供化学飞溅保护和适当的实验室服装(全长裤,闭趾鞋等)。

当制备的BrdU溶液存在雾化的可能性时,应佩戴N95呼吸器。请注意,使用N95呼吸器需要医疗许可和适合测试,以符合29 CFR 1910.134。在购买或佩戴呼吸防护之前,请与环境健康与安全办公室联系。

当在LASC空间中使用BrDU时,PPE应与在ABSL2中工作时相同。这包括头罩、护目镜、N-95呼吸器、围身长袍、双手套和鞋套。所有ABSL-2个人防护用品均为一次性使用,在离开LASC空间后应在指定的生物废物容器中处理。任何时候打开微隔离笼都需要这种个人防护装备(见第五节)。

四、实验动物程序

因为BrdU是一种诱变剂、致畸剂和细胞毒素,所以必须小心处理。孕妇不应以任何形式接触或处理这种化学物质。

为确保澳门威尼斯人注册网站研究人员的安全,BrdU溶液应在化学通风柜内处理和准备,该通风柜最近已由环境健康与安全办公室批准的第三方供应商进行了测试。请与环境健康与安全办公室联系以获取更多信息。BrDU制备后,工作区域应用肥皂和水彻底清洁。任何可见的污染或泄漏应与10%的新鲜漂白剂溶液中和,以使化学物质在清洁之前失去活性。

建议动物的床上用品应该用玉米皮(通常用于啮齿动物)或其他类似材料制成,以尽量减少灰尘的产生。纸板、纸张或其他易碎材料应尽可能避免使用。当换笼柜中不需要换笼时,应在床上用品下面放置一个可以简单卷起并处理的塑料衬垫。

1)急性管理

急性给药通常是在安乐死前几小时将指定剂量的BrdU IV或IP注射到动物体内。

用过的针头必须在使用后立即弃置在认可的锐器容器内。使用过的针头在处理前不应放在工作台上,剪切,弯曲或重新盖上。

在可行的情况下,应使用自护套针,以避免意外刺伤的可能性。

为避免吸入气溶胶的可能性,向较小的澳门威尼斯人注册网站研究动物注射BrdU应始终在经过认证的II类或III类生物安全柜中进行。对于非人类灵长类动物,建议使用N95呼吸器。

2)长期的管理

BrdU可以通过静脉注射或IP注射、饮用水或渗透泵给药给药。

慢性静脉或IP给药BrdU应遵循与上述急性给药相同的注射程序。

BrdU可以每天在饮用水中(0.25-1 mg/ml)给予小鼠,持续6周,或者每天通过腹腔注射(在100µl无菌生理盐水中注射~2 mg)持续1周。含有BrdU的水瓶遮光以防止BrdU降解,并且每周更换两次水。在第一周内,可在饮用水中加入1%葡萄糖以克服味觉厌恶。手术的总时间为1小时至6周,之后对动物实施安乐死。必须配制BrdU饮用水溶液

在适当的化学通风柜中。应将废饮用水稀释至10%的新鲜无汞漂白剂的最终溶液,然后可在排水管中处理。水瓶应该用10%的新鲜无汞漂白剂清洗。应穿戴适当的个人防护装备(见第三节)。

渗透泵应在适当的化学通风柜中准备。操作泵时必须戴上手套。应穿戴适当的个人防护装备(见第三节)。

3)监测动物在长期给药期间的毒性

BrdU,由于其对细胞分裂的作用,主要针对免疫系统,包括骨髓和胃肠道。可能的副作用包括干扰骨髓祖细胞,进而可能导致白细胞减少或贫血。胃肠道粘膜可能出现的副作用包括便血或腹泻。

在第一周,每周必须对小鼠进行3-4次评估,之后每周进行一次评估,以评估其总体外观、在笼子内正常移动和接触食物和水的能力、饮食能力、梳理习惯、肤色、嗜睡和攻击性(如果出现攻击性行为,将单独饲养)。采用体况评分指数对小鼠进行评价。

长期服用BrdU的大型动物,除了监测食欲、体重和行为举止外,还需要定期通过CBC和化学分析进行监测。

五、长期给药期间的动物住房

在长期BrdU给药过程中,必须将饲养的较小动物饲养在过滤器顶部的微隔离笼中,以尽量减少潜在污染的床上用品和排泄物的雾化。在微型隔离笼中饲养的动物可能与ABSL 1的其他动物被安置在同一个房间。

六。床上用品及屠体废物的处理

澳门威尼斯人注册动物排泄物中是否存在BrdU的澳门威尼斯人注册网站研究尚无定论。因此,所有床上用品应作为受管制的医疗废物处理,并包装焚烧。同样,所有动物的尸体在安乐死后都应该被包装起来用于医疗废物焚烧。

7。床上用品更换和笼子清洗

床上用品更换和笼子清洗应在经批准的笼子清洗设施中进行,该设施应保持负压。换笼人员必须按照上述要求穿戴适当的个人防护装备。在可行的情况下,使用过的床上用品应在笼子更换柜内更换。如果没有这样的设备,或者笼子太大而无法放入橱柜,则应在床上用品下面使用吸水盘衬垫,并滚动以方便更换床上用品并尽量减少灰尘的产生。

8。化学品泄漏

1)主要的原液溢出

隔离区域并向环境健康与安全办公室报告泄漏(医学院617-414- 6666,或CRC 617-353-7233)。应避免直接接触原液。

2)轻微的泄漏

用纸巾或从最近的化学品泄漏包中取出的吸水垫来控制泄漏并清理散装材料。对于粉末的溢出,将吸收材料弄湿可能是有帮助的。先用10%的漂白剂清洗,然后再用肥皂和水。

除了上文第三节所述的个人防护装备外,在处理泄漏时还应使用一层丁腈手套或同等物品。

信息…

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