小鼠和大鼠基因分型组织收集（IACUC）

使用尾巴活检（也称为尾尖截肢，尾巴剪断，或尾）对小鼠进行基因分析必须有科学依据。应在断奶前（大多数菌株为21天）进行基因分型。31天以上小鼠的尾巴活检需要麻醉。

背景

对单个小鼠的DNA进行分析是鉴定转基因动物的必要条件，这些转基因动物可以作为有价值的澳门威尼斯人注册网站研究模型。该分析所需的小鼠组织的性质和数量取决于所进行的DNA测试的类型。虽然需要进行基因分型的转基因大鼠品系较少，但澳门威尼斯人注册网站研究和开发的用于小鼠的方法是合适的，因为它们的发育轨迹是相似的（出生时为晚熟，断奶时间为21天）。

由于聚合酶链式反应需要扩增，目的基因可以用非常小的DNA样本进行鉴定。少量外周血、毛发、唾液、耳孔活检和尾部活检通常足以进行PCR检测。实体组织，如尾巴或耳朵活检，提供最一致的扩增，以确定动物DNA片段的存在或缺失。小鼠尾巴活检程序是最常用的程序，以获得组织的PCR测试。

在小于或等于21天的幼鼠中，尾巴尖端附近的组织是柔软的，骨头还没有完全矿化。因此，对未断奶小鼠的尾尖进行截肢被认为只会给小鼠带来短暂的疼痛。

当小鼠达到3-4周龄时，尾部组织成熟包括骨矿化和血管增加。对老年动物进行尾尖截肢可能会造成短暂的疼痛，必须使用适当的麻醉。

指导方针

1. 只有在科学合理的情况下，才能对小鼠进行尾巴活检以进行遗传分析。建议在12 ~ 17日龄进行剪尾。10-21日龄时，尾剪的DNA产量最高。然后在小鼠21日龄断奶时将阴性小鼠剔除。如果可以从较少侵入性的方法（如耳朵活检）收集的样本中获得足够的小鼠基因分型材料，则首选较少侵入性或痛苦的方法。耳穿刺活检具有同时采样和小鼠鉴定的优点。耳穿孔应在12天后进行，一旦耳廓足够大，并适当地定向以适应穿孔。修剪脚趾不是一个标准的程序，必须在IACUC申请表中证明并在8天之前进行。
2. 对断奶后的老鼠进行尾巴活检是一个潜在的痛苦过程。虽然建议在断奶前（21天）进行尾巴活检，但必须在31天后进行麻醉由于这种分类，对21日龄以上的小鼠进行尾巴剪断的建议必须伴随着对这种可能痛苦的手术的替代方法的澳门威尼斯人注册网站研究。
3. 去除尾部组织的总量应保持在进行试验所需的最小量。截尾长度不应超过5毫米（通常2毫米就足够了）。老鼠用尾巴来调节体温和保持平衡。小鼠的尾巴也是采集血液、静脉注射和约束等澳门威尼斯人注册网站研究程序的重要部位。
4. 尾巴的剪断可以用剃须刀片或锋利的剪刀进行。最好使用剃须刀片。如果使用剪刀，必须在动物之间用70%的乙醇擦拭干净。
5. 在将剪断尾巴的老鼠放回笼子之前，必须确保止血。当在<21天的推荐年龄剪断尾巴时，通过在尾巴末端周围直接手动按压很容易实现止血。轻，直接压力最大限度地减少组织损伤和随后的老鼠造成的尾部创伤的风险。不鼓励用热灼烧被切除的尾巴末端。可以使用医用级无毒的止咳粉。如果摄入硝酸银是有毒的，因此不建议用于此目的，因为小鼠可能会摄入该制剂。严禁在老鼠尾巴上使用止血带。如果遇到或预计会遇到止血问题（例如，患有凝血障碍的小鼠），请与兽医人员联系以获得建议。
6. 不鼓励在单个小鼠上重复断尾，但如果需要，累计断尾不应超过5毫米。如果以后需要从小鼠身上获得额外的样本，将原始组织切片一分为二，并将额外的切片保存在- 20至- 80°C。

推荐程序

剪尾时请遵循以下步骤：

历史

生效日期：05/10/2022下次审核日期：05/09/2025